1.原理

血样用酸脱去蛋白，离心后取上清液,在283.3nm波长下,用石墨炉原子吸收光谱法测定铅含量。

2 仪器

2.1 具塞聚乙烯塑料试管，5ml。

2.2 具塞试管，5ml。

2.3 具塞塑料离心管，1.5ml。

2.4 旋涡混合器。

2.5 离心机，12000r／min。

2.6 微量取液器。

2.7 原子吸收分光光度计  具石墨炉、背景校正装置和铅空心阴极灯。

仪器操作条件：

干  燥      80～20O℃， 55s ；

灰  化      600～650℃，    20s；

原子化      2600℃，        5s（停气）；

清  除      2800℃，        3s。

3 试剂  实验用水为去离子水,所用试剂为优级纯。

3.1 肝素钠溶液，5g／L。

3.2 硝酸（优级纯）溶液，1％(V／V)。

3.3 硝酸（优级纯）溶液，5％(V／V)。

3.4 牛血，肝素抗凝，－20℃保存，用时放至室温摇匀。

3.5 铅标准溶液：称取0.1000g金属铅，溶于lml硝酸中，加水稀释至100ml；或称取0.1599g硝酸铅(优级纯，100℃干燥2h)，用1％(V／V)硝酸溶液溶解并稀释至100ml。此溶液为1.0mg/ml铅标准贮备液。贮存于聚乙烯塑料瓶中，冰箱内保存。临用前，用1％(V／V)硝酸溶液逐级稀释成50.0μg/ml铅标准溶液。或用国家认可的铅标准溶液配制。

4 样品的采集、运输和保存

采集静脉血，置于事先加入肝素钠溶液(用置为每m1血加20～40μl)的具塞聚乙烯试管中，充分混匀。于冰瓶内运输。4℃下可保存3周。

5 分析步骤

5.1 样品处理：

将冷藏血样取出，恢复到实验室温度。充分振摇混匀，取出0.15ml，置具塞聚乙烯离心管内，供测定。同时作空白试验：取0.75ml5％(V／V)硝酸溶液，与样品同时进行测定。

5.2 标准曲线的绘制:

用1％（V/V）硝酸溶液稀释标准溶液成1.25、2.5、5.0、10.0、12.5、μg/ml标准系列。于6只具塞试管中，第一只加入0.2ml1％（V/V）硝酸溶液，其余各管分别加入0.20ml不同浓度的标准系列，再各加4.80ml牛血，配制成0、50、100、200、400、500μg/L铅标准系列。各取出0.15ml于具塞聚乙烯离心管内，各管加入0.6ml 5％（V/V）硝酸溶液，立即盖好盖子，强力振摇，然后在旋涡混合器上振摇15s。静置15min，离心5min。参照仪器操作条件，将原子吸收分光光度计调整到最佳测定状态。取10μl上清液进样，测定各标准管。从第3～6管的吸光度值减去第1管的吸光度值后，以铅的浓度对相应的吸光度绘制标准曲线。

5.3 样品测定：

用测定标准系列的操作条件测定样品溶液和试剂空白溶液；测得的样品吸光度值减去试剂空白吸光度值后，由标准曲线得铅的浓度（μg/L）。

6 计算  按式（8-14）计算血样中铅的浓度：

C ＝ c × F …………………………… （8-14）

式中：C--血中铅的浓度，μg/L ；

c--由标准曲线得的稀释血样中铅的浓度，μg/L；

F—稀释倍数。

7.说明

7.1 本法的最低检出浓度为5μg/L (按取0.15ml血样计)；相对标准偏差为3.3％～5.5％(n＝6)。

7.2 血样采集时间不限，采血时必须离开工作场所。采样前对采样部位顺次用肥皂、清水、1％（V/V）硝酸溶液擦洗，再用酒精消毒。

7.3 用标准加入法测定，可消除基体的干扰。

7.4 本法的样品处理简单，不需加入基体改进剂。线性范围较宽(O～500μg/L )，还可适当延长。更适用于职业卫生铅工作场所劳动人群血铅的检测。

7.5 采样和测定所用的器皿和容器，在使用前，应在1+1硝酸溶液中浸泡12h以上，再用去离子水冲洗干净。 

7.6 本法由中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所李春玲、吴宜群研制。标准编号为 WS/T 174－1999。

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