一、收集和贮存的基本原则
1、所采样品要有代表性
能反应劳动者的实际接触情况。
保证有一定样本量,应根据实验方法的需要事先计算好。
2、防止污染
采样、运输及保存的容器、采样工具等的材质不干扰测定。
采样、运输及保存过程要防止外来污染。
3、所采样品要稳定不变质
防止腐败变质。
防止采集后挥发、蒸发、吸附、降解、沉淀等。
冷冻保存和运输。
4、加入的防腐剂、抗凝剂等不能干扰后续的分析检测。
5、正确的采样和保存时间
6、足够的采样体积
一般尿样不少于50ml,静脉血不少于5ml,末梢血和其他样品根据需要确定。
生物样品包括体液和组织,如全血、血浆、血清、尿液、粪便、唾液、毛发、乳汁、脊髓液、精液等。
常用:尿液、血液(血浆、血清、全血)、毛发、唾液
二、样品的收集和贮存
1、样品的收集
1)、尿液
最常用的生物材料:大多数化学物/代谢产物可随尿液排泄;尿中含量与血液含量有一定关联性;容易收集;易被接受。
采样时间:主要依据毒物在体内的半减期而定,半减期短的接触者尿中毒物的检出是代表近期接触。半减期长的毒物,则代表相当一段时间接触的平均浓度。在实际工作中有采一次尿、晨尿、阶段尿和全日尿之分。
需用比重或肌酐法校正,这两种方法各有优缺点,可根据情况选择使用。
尿采样时还应注意污染问题。特别是测定尿中金属时,应使用适当材料和特殊处理的容器。
采集后的尿要妥善保存。
2)、血液
优点:血中毒物的含量可反映毒物在体内的近期接触水平;含量较稳定;取样污染机会少;不受肾功能影响等。缺点:有损伤性,常不易被受检者所接受。
血样分全血、血清、血浆和血细胞,可采静脉血、指血和耳血,应根据需要加以选择。
采样时应正确使用抗凝剂及防止溶血。由于毒物常常与血清蛋白结合,要注意解离的方法。
有蓄积性的毒物血中浓度主要反映机体的负荷。并应注意血中浓度与蓄积部位含量的相关关系。
3)、呼出气
终末呼出气的分析主要用于接触挥发性有机毒物的评价。
突出的优点是无损伤性,其主要缺点是易污染,波动大。
采集时,应注意区别混合呼出气和终末(肺泡)呼出气;通常在接触期间,混合呼出气中毒物的浓度大于终末呼出气。接触后,混合呼出气中浓度小于终末呼出气。
采样时间非常严格。特别是采工人班后呼出气样,绝大多数溶剂浓度在停止接触后迅速下降,必须立即采集,这在实际工作中是有困难的。
影响因素较多,采样时应控制条件。心输出量、肺通气量的大小对肺泡气中毒物浓度均有影响
4)、其他材料
乳汁和脂肪组织:可反映亲脂毒物的负荷,也可用于评价毒物是否能转运到新生儿,如有机磷农药、氯乙烯和二硫化碳等。
粪便:主要反映经口摄入的水平,在职业医学中实际意义不大。
头发和指甲可能有外污染,需要解决洗涤问题。
汗液、痰和唾液均可能成为良好的生物检测的材料,但整个方法学尚未解决,如存在分泌率、外污染等问题,常规使用受到限制。
2、采样时间和频率
根据毒物动力学规律(主要为半减期)选择最佳采样时点。
常规采样时间,大部分为班后和停止接触后16小时,即第二天班前。有时需要采班中、周一班前和周末。
在职业接触生物限值中应包括采样时间的规定,监测时必须严格遵循。
频率决定于半减期的长短,一般说半减期长者采样周期可长,短者则需频率高。
3、样品的贮存
样品应在采样后及时分析,但一般难以做到。故应妥善保存,常用的贮存方法有以下几种:
1、低温保存
尿样一般贮于4℃冰箱或低温冰箱(-20~70℃)冷冻保存;必要时需添加稳定剂。血样的保存条件较为严格,现场应用冰瓶保存并应及时送检。到达实验室后,根据不同情况选择4℃冰箱或低温冰箱保存,特别是一些血清酶的分析。
2、冷冻脱水或低压冷冻法
经此处理的样品可在室温下长期保存。
3、灰化保存
痕量金属元素的分析多用这种方法。
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